Preclinical study of experimental burns treated with photobiomodulation and Human Amniotic Membrane, both isolated and associated / Estudo pré-clínico de queimaduras experimentais tratadas com fotobiomodulação e membrana amniótica humana, isoladas e associadas / Estudio preclínico de quemaduras experimentales tratadas con fotobiomodulación y membrana amniótica humana, solas y combinadas

Abstract Objective: to evaluate the effect of photobiomodulation with low-level 660 nm laser alone or associated with Human Amniotic Membrane in the repair of partial-thickness burns in rats. Method: an experimental study conducted with 48 male Wistar rats, randomized into four groups: Control, Human Amniotic Membrane, Low-Level Laser Therapy, and Low-Level Laser Therapy associated with Human Amniotic Membrane. The histopathological characteristics of the skin samples were analyzed 7 and 14 days after the burn. The data obtained were submitted to the Kolmogorov-Smirnov and Mann-Whitney tests. Results: the histological analysis of the burn injuries showed a decrease in inflammation (p<0.0001) and an increase in proliferation of fibroblasts (p<0.0001) mainly at 7 days in all treatments related to the control group. At 14 days, the greater effectiveness in accelerating the healing process was significant (p<0.0001) in the Low-Level Laser Therapy group associated with the Human Amniotic Membrane. Conclusion: the association of photobiomodulation therapies with the Human Amniotic Membrane allowed verifying a reduction in the healing process time of the experimental lesions, stimulating its proposal as a treatment protocol in partial-thickness burns.

Resumo Objetivo: avaliar o efeito da fotobiomodulação com laser de baixa intensidade 660 nm isoladamente ou associada à membrana amniótica humana no reparo de queimaduras de espessura parcial em ratos. Método: estudo experimental com 48 ratos Wistar machos, randomizados em quatro grupos: Controle, Membrana Amniótica Humana, Terapia a Laser de Baixa Intensidade e Terapia a Laser de Baixa Intensidade associado à Membrana Amniótica Humana. As características histopatológicas das amostras de pele foram analisadas aos 7 e 14 dias após a queimadura. Os dados obtidos foram submetidos aos testes de Kolmogorov-Smirnov e Mann Whitney. Resultados: a análise histológica das lesões por queimadura mostrou a diminuição da inflamação (p <0,0001) e aumento da proliferação de fibroblastos (p <0,0001), principalmente nos 7 dias em todos os tratamentos relacionados ao grupo controle. Aos 14 dias, a maior efetividade na aceleração do processo cicatricial foi significativa (p<0,0001) no grupo Terapia a Laser de Baixa Intensidade associado à Membrana Amniótica Humana. Conclusão: a associação das terapias de fotobiomodulação à membrana amniótica humana permitiu comprovar redução no tempo do processo cicatricial das lesões experimentais, estimulando sua proposição como protocolo de tratamento em queimaduras de espessura parcial.

Resumen Objetivo: evaluar el efecto de la fotobiomodulación con láser de baja intensidad 660 nm de sola o combinada con la membrana amniótica humana en la reparación de quemaduras de espesor parcial en ratas. Método: estudio experimental con 48 ratas Wistar macho, aleatorizadas en cuatro grupos: Control, Membrana Amniótica Humana, Terapia con Láser de Baja Intensidad y Terapia con Láser de Baja Intensidad combinada con la Membrana Amniótica Humana. Las características histopatológicas de las muestras de piel fueron analizadas a los 7 y 14 días después de la quemadura. Los datos obtenidos fueron sometidos a las pruebas de Kolmogorov-Smirnov y Mann-Whitney. Resultados: el análisis histológico de las lesiones por quemadura mostró una disminución de la inflamación (p <0,0001) y un aumento de la proliferación de fibroblastos (p <0,0001) principalmente a los 7 días en todos los tratamientos en comparación con el grupo control; a los 14 días, en el grupo de Terapia con Láser de Baja Intensidad combinada con la Membrana Amniótica Humana la mayor efectividad en la aceleración del proceso de cicatrización fue significativa (p<0,0001). Conclusión: la asociación de terapias de fotobiomodulación con la membrana amniótica humana permitió comprobar que hubo una reducción en el tiempo del proceso de cicatrización de lesiones experimentales, lo cual favorece que se proponga como protocolo de tratamiento en quemaduras de espesor parcial.

Interleukin-37 has A Promising Cardioprotective Effect on Isoproterenol-Induced Myocardial Infarction / La Interleucina-37 tiene un Efecto Cardioprotector Prometedor sobre el Infarto de Miocardio Inducido por Isoproterenol

SUMMARY: The main cause of mortality and disability globally is myocardial infarction (MI). Isoproterenol (ISO), a β-adrenoceptor agonist, has been used to induce rat myocardial necrosis. Whereas interleukin-37 (IL-37) has anti-inflammatory and cytoprotective properties. The study aimed to investigate the potential protective effects of IL-37 administration on cardiac architecture, oxidative stress, and inflammatory markers during ISO-induced MI in rats. Three groups of adult male rats were used in this study, the normal control group (n=8), ISO-induced MI group (n=8) that received isoproterenol hydrochloride (ISO) (100 mg/kg/day, SC, for the first 2 consecutive days), and IL-37-treated group (ISO+IL-37) (n=8) that received recombinant human IL-37 (40 µg/kg /day, intraperitoneally, for 2 weeks during and after ISO injections. Heart rate (HR.) and ECG changes were monitored. Some oxidative stress markers such as superoxide dismutase (SOD), nitric oxide (NOx), malondialdehyde (MDA), and glutathione (GSH) tissue levels in the tissue homogenate were assayed. Interleukin- 6 (IL-6), tumor necrosis factor- α (TNF-α), caspase-8, P53, and C- reactive protein (CRP) were among the inflammatory markers examined. In addition, serum levels of creatinine kinase (CK-MB) and lactate dehydrogenase (LDH) were analyzed to evaluate the myocardial injury. For histological analysis, tissues were sectioned, fixed in paraffin, and stained with hematoxylin and eosin (H&E), Masson Trichrome and, immunohistochemical against NF-kB, TNF-α, and Caspase-9. IL-37 improved ECG changes, cardiac enzyme markers, and some inflammatory markers of oxidative stress in ISO-induced MI. It also improved the histopathological and immunohistochemical changes in MI. In conclusion: IL-37 might be a promising therapeutic modality in myocardial infarction.

La principal causa de mortalidad y discapacidad a nivel mundial es el infarto de miocardio (IM). El isoproterenol (ISO), un agonista de los receptores adrenérgicos β, se ha utilizado para inducir necrosis miocárdica en ratas. Mientras que la interleucina-37 (IL-37) tiene propiedades antiinflamatorias y citoprotectoras. El estudio tuvo como objetivo investigar los posibles efectos protectores de la administración de IL-37 en la arquitectura cardíaca, el estrés oxidativo y los marcadores inflamatorios durante el infarto de miocardio inducido por ISO en ratas. En este estudio se utilizaron tres grupos de ratas macho adultas, el grupo control normal (n=8), el grupo con IM inducido por ISO (n=8) que recibió clorhidrato de isoproterenol (ISO) (100 mg/kg/día, SC, durante los primeros 2 días consecutivos) y el grupo tratado con IL-37 (ISO+IL- 37) (n=8) que recibió IL-37 humana recombinante (40 µg/kg/día, por vía intraperitoneal, durante 2 semanas durante y después de las inyecciones de ISO. Se monitorearon la frecuencia cardíaca (FC) y los cambios en el ECG. Se analizaron algunos marcadores de estrés oxidativo como la superóxido dismutasa (SOD), el óxido nítrico (NOx), el malondialdehído (MDA) y los niveles tisulares de glutatión (GSH) en el homogeneizado de tejido. La interleucina-6 (IL-6), el factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), la caspasa-8, la P53 y la proteína C reactiva (CRP) se encontraban entre los marcadores inflamatorios examinados. Se analizaron los niveles de creatinoquinasa (CK-MB) y lactato deshidrogenasa (LDH) para evaluar la lesión miocárdica; para el análisis histológico se seccionaron los tejidos, se fijaron en parafina y se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E), Tricromo de Masson e inmunohistoquímica contra NF-kB, TNF-α y Caspasa-9. IL-37 mejoró los cambios de ECG, los marcadores de enzimas cardíacas y algunos marcadores inflamatorios de estrés oxidativo en el IM inducido por ISO. Además mejoró los cambios histopatológicos e inmunohistoquímicos en MI. En conclusión: la IL-37 podría ser una modalidad terapéutica prometedora en el infarto de miocardio.

Effect of Clomiphene Citrate on the Ultrastructure of Testis in Albino Rats

SUMMARY: The aim of the present work was to study the closer effect of clomiphene citrate on the ultrastructure of the testis of adult albino rats to provide a basis for optimizing this drug in the treatment of male infertility. The testes were removed from both groups under anesthesia and then prepared for examination by light using hematoxylin and eosin stains and a transmission electron microscope. Semithin sections were cut into 1 µm thick sections, stained with toluidine blue, and examined by light microscopy for a survey. The desired areas were placed in the center, and other areas were trimmed. Primary spermatocytes showed marked nuclear changes (pyknosis), and their nuclear membranes were ill-defined and disrupted. The cytoplasm showed widespread degeneration of mitochondria and lysosomes and focal degeneration of the rough endoplasmic reticulum compared with the control group. The spermatids were pale, and the two phases of spermatogenesis were distinctly identifiable in the control group but were confused in the treated group. Some spermatids had interrupted nuclear membranes, also containing degenerated mitochondria, focal fragmentation of rough endoplasmic reticulum, and free ribosomes. Spermatozoa in the treated group appeared deformed compared to the control, where they had deformed head caps. Leydig cells of the treated group have an irregularly shaped nucleus, with focal chromatin aggregation and peripheral chromatin condensation on the inner surface of the nuclear membrane. The observations of the present work indicate a possible causal relationship between testicular affection and ingestion of clomiphene citrate, which can be avoided by close medical observations using ultrasonography, semen analysis, or testicular biopsy to detect early malignant changes. Furthermore, the drug should not be used for more than three to six cycles and should be stopped for at least three cycles before reuse. When clomiphene citrate is ineffective in the treatment of male infertility, human menopausal gonadotropin (hMG) administration is typically selected. However, high-dose hMG therapy is associated with a variety of adverse effects. In this work, we report the success of a modified clomiphene citrate regimen in increasing sperm count without any hazards to the testicular tissue.

El objetivo del trabajo fue estudiar el efecto del citrato de clomifeno sobre la estructura de los testículos de la rata albina adulta, con la finalidad de determinar la mejor manera de utilizar este fármaco en el tratamiento de la infertilidad masculina. Los testículos se extrajeron bajo anestesia y para su análisis a través de microscopio de luz se tiñeron con HE. Además, las muestras fueron preparadas para su examen con microscopía electrónica de transmisión. Por otra parte, se cortaron secciones semifinas de 1 µm de espesor, se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron mediante microscopía óptica. Los espermatocitos primarios mostraron cambios nucleares marcados (picnosis) y sus membranas nucleares estaban mal definidas y alteradas. En el grupo experimental las células presentaban el citoplasma con degeneración generalizada de las mitocondrias y de los lisosomas y una degeneración focal del retículo endoplásmico rugoso en comparación con el grupo control. Las espermátidas estaban pálidas y las dos fases de la espermatogénesis eran claramente identificables en el grupo control, pero se confundían en el grupo tratado. Algunas espermátidas tenían membranas nucleares interrumpidas, y también contenían mitocondrias degeneradas, fragmentación focal del retículo endoplásmico rugoso y ribosomas libres. Los espermatozoides del grupo tratado se presentaban deformados en comparación con el control. Las células de Leydig del grupo tratado presentaban un núcleo de forma irregular, con agregación focal de cromatina y condensación de cromatina periférica en la superficie interna de la membrana nuclear. Las observaciones del presente trabajo indican una posible relación causal entre la afección testicular y la ingestión de citrato de clomifeno, que puede evitarse mediante observaciones médicas minuciosas a través de ecografía, análisis de semen o biopsia testicular para detectar cambios malignos tempranos. Además, el medicamento no debiera ser usado durante más de tres a seis ciclos y debe suspenderse durante al menos tres ciclos antes de volver a usarlo. Cuando el citrato de clomifeno es ineficaz en el tratamiento de la infertilidad masculina, normalmente se selecciona la administración de gonadotropina menopáusica humana (hMG). Sin embargo, la terapia con hMG en dosis altas se asocia con una variedad de efectos adversos. En este trabajo, informamos el éxito de un régimen modificado con citrato de clomifeno para aumentar el recuento de espermatozoides sin riesgo para el tejido testicular.

Effect of fried sunflower oil intake on mandibular biomechanical competence of growing rats / Efecto del consumo de aceite de girasol termooxidado sobre la competencia biomecánica de la mandíbula, en animales en crecimiento

ABSTRACT Previous studies by us demonstrated that the consumption of thermally oxidized oil diet adversely affects body growth, lipid metabolism, bone mass and femur biomechanical competence. Aim: The aim of this study was to evaluate the effects of a diet containing fried sunflower oil on the mandible of growing rats. Materials and Method: Male Wistar rats (21±1 day old) (n=21) were assigned at weaning to one of three diets for 8 weeks: a control diet (C), a diet containing sunflower oil (SFO) or a diet containing sunflower oil that had been repeatedly heated (SFOx); both SFO and SFOx were mixed with commercial rat chow at 13% (w/w). The consistency and viscosity of the 3 diets were similar. Zoometrics and food intake were recorded weekly. At wk=8, mandibular growth was assessed by measurements of anatomical points of cleaned bones, and mandible biomechanical competence was assessed to estimate the structural properties of the bone. Statistical analysis was performed by SPSS v. 20.0. Results: Rats fed SFOx diet attained the lowest final body weight (P=0.0074), mandibular weight (P=0.0001) and mandibular /length (P=0.0002). Load bearing capacity (Wf;N), load of yielding (Wy;N) and stiffness (Wy/dy;N/mm) of the mandible were negatively affected by both sunflower oil diets (fresh and fried) (P=0.001; P=0.002; P=0.003, respectively) though SFOx induced the most significant reduction in Wy/dy (C:44.4(5.4) > SFO:36.1(2.1) > SFOx: 26.3(3.7) N/ mm; P=0.003). The deleterious effect of SFOx on mandibular growth was more accentuated on the posterior part of the bone (C:11.4(0.3)=SFO:11.2(0.2)>SFOx: 10.7(0.2) mm; p=0.0005); the anterior/ posterior ratio (C:1.25(0.02)=SFO:1.27(0.02)<SFOx:1.32(0.03); p=0.0001) indicated that SFOx induced mandibular deformation. Conclusion: Consumption of SFOx diet during growth could affect mandibular morphometric properties and biomechanical competence, in terms of bone stiffness.

RESUMEN En estudios previos hemos demostrado los efectos adversos del consumo de una dieta rica en aceite termooxidado sobre el crecimiento corporal, el metabolismo de los lípidos, la masa ósea y la competencia biomecánica del fémur. Objetivo: El objetivo de este trabajo fue investigar el efecto de una dieta rica en aceite de girasol termooxidado (AGX) sobre los parámetros morfométricos y biomecánicos de la mandíbula de rata en crecimiento. Materiales y Método: Ratas macho Wistar de 22±1 días de edad (n=21) recibieron durante 8 semanas una de 3 dietas: control (C); dieta comercial, una dieta suplementada con aceite de girasol (AG) y una dieta suplementada con AGX. La consistencia y la viscosidad de las dietas fueron similares. Los parámetros zoométricos y el consumo de dieta se registraron semanalmente. A T=8, los animales se eutanasiaron y se obtuvieron las hemimandíbulas. El crecimiento mandibular se estimó por medidas morfométricas entre puntos anatómicos y las propiedades estructurales por biomecánica. El análisis estadístico se realizó por SPSS v. 20.0. Resultados: Las ratas alimentadas con AGX presentaron menor peso corporal final (p=0.0074), peso mandibular (p=0.0001) y longitud mandibular (p=0.0002). Las propiedades estructurales de la mandíbula, Wf (p=0.001), Wy (p=0.002) y Wy/dy (p=0.003), se vieron afectadas negativamente en ratas alimentadas con AG o AGX, respecto a C; pero la rigidez ósea (Wy/dy) en AGX fue significativamente menor (C:44.4(5.4) > SFO:36.1(2.1) > SFOx: 26.3(3.7) N/mm; p=0.003). El efecto deletéreo del AGX sobre el crecimiento mandibular fue más acentuado en la región posterior (C:11.4(0.3)=SFO:11.2(0.2)>SFOx: 10.7(0.2) mm; p=0.0005). La relación anterior/posterior (C=1.25 (0.02); AG= 1.27(0.02) y AGX=1.32(0.03), p=0.001) indica que AGX indujo deformación mandibular. Conclusiones: El efecto adverso del consumo de una dieta rica en AGX durante el crecimiento podría afectar los parámetros morfométricos y la biomecánica ósea en términos de rigidez ósea.

The Role and Mechanism of Aspirin Combined with Rehabilitation Training in the Repair of Sciatic Nerve Injury and the Changes in the Schwannocytus (Schwann Cells) in Rats / Rol y Mecanismo de la Aspirina Combinados con Entrenamiento de Rehabilitación en la Reparación de la Lesión del Nervio Ciático y los Cambios en los Schwannocitos (Células de Schwann) en Ratas

SUMMARY: This study investigated the role and mechanism of aspirin combined with rehabilitation training in the nerve injury repair and Schwann cell changes in rats with sciatic nerve injury. Totally, 120 male healthy SD rats were randomly divided into sham, model, aspirin, and aspirin + rehabilitation groups, with 30 rats in each group. The sciatic nerve function index (SFI), photothermal pain tolerance threshold and inclined plane test results at 4, 6, and 8 weeks after operation were compared. The distance of sensory nerve regeneration and the expression of S100B protein in Schwann cells were analyzed. Compared with the sham group, the SFI of the model, aspirin, and aspirin+rehabilitation groups were significantly lower at 4, 6, and 8 weeks after operation. However, the aspirin and aspirin+rehabilitation groups had significantly higher SFI than the model group. The SFI at 6 and 8 weeks after operation was higher in the aspirin+rehabilitation group than that in the aspirin group (P<0.05). The photothermal pain tolerance threshold of the sham, aspirin, and aspirin+rehabilitation groups were significantly higher than those of the model group at 4, 6, and 8 weeks after operation (P<0.05). The inclination angles of the model, aspirin, and aspirin+rehabilitation groups were significantly lower than those of the sham group at 4, 6, and 8 weeks after operation, and the inclination angle of the aspirin+rehabilitation group was significantly higher than that of the model and aspirin groups (P<0.05). The sensory nerve regeneration distance in aspirin and aspirin+rehabilitation groups was higher than that in the sham and model groups (P<0.05). The expression of S100B protein in the aspirin and aspirin+rehabilitation groups was higher than that in the model group (P<0.05). Aspirin combined with rehabilitation training can promote the functional recovery of sciatic nerve injury, and the mechanism may be related to the increase of the expression of S100B protein in Schwann cells.

En este estudio se investigó el papel y el mecanismo que desempeña la aspirina combinada, con el entrenamiento de rehabilitación en la reparación de lesiones nerviosas y los cambios en los schwannocitos en ratas con lesiones en el nervio ciático. En total, 120 ratas SD macho sanas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos de 30 ratas en cada uno: simulación, modelo, aspirina y aspirina + rehabilitación. Se compararon el índice de función del nervio ciático (SFI), el umbral de tolerancia al dolor fototérmico y los resultados de la prueba del plano inclinado a las 4, 6 y 8 semanas después de la operación. Se analizó la distancia de regeneración del nervio sensorial y la expresión de la proteína S100B en los schwannocitos. En comparación con el grupo simulado, el SFI de los grupos modelo, aspirina y aspirina+rehabilitación fue significativamente menor a las 4, 6 y 8 semanas después de la operación. Sin embargo, los grupos de aspirina y aspirina + rehabilitación tuvieron un SFI significativamente más alto que el grupo modelo. El SFI a las 6 y 8 semanas después de la operación fue mayor en el grupo de aspirina + rehabilitación que en el grupo de aspirina (P<0,05). El umbral de tolerancia al dolor fototérmico de los grupos simulado, aspirina y aspirina+rehabilitación fue significativamente mayor que el del grupo modelo a las 4, 6 y 8 semanas después de la operación (P<0,05). Los ángulos de inclinación de los grupos modelo, aspirina y aspirina+rehabilitación fueron significativamente menores que los del grupo simulado a las 4, 6 y 8 semanas después de la operación, y el ángulo de inclinación del grupo aspirina+rehabilitación fue significativamente mayor que el de los grupos modelo y aspirina (P<0.05). La distancia de regeneración del nervio sensorial en los grupos de aspirina y aspirina+rehabilitación fue mayor que en los grupos simulado y modelo (P<0,05). La expresión de la proteína S100B en los grupos de aspirina y aspirina+rehabilitación fue mayor que en el grupo modelo (P<0,05). La aspirina combinada con el entrenamiento de rehabilitación puede promover la recuperación funcional de la lesión del nervio ciático, y el mecanismo puede estar relacionado con el aumento de la expresión de la proteína S100B en los schwannocitos.

Postnatal Exposure to Exogenous progesterone Exacerbates the Prenatally-Induced Abnormal Sperms Production and Function in Rats / La exposición Posnatal a la Progesterona Exógena Exacerba la Producción y Función Anormales de Espermatozoides Inducidas Prenatalmente en Ratas

SUMMARY: This study aimed at clarifying the impact of long-term prenatal and postnatal exposure to exogenous progesterone on sperm production and function, relative sex organs weights, and the levels of the relevant hormones in rats. Sixty male Wistar rats were included and classified into three groups (n=20 in each). A test I group had mature rats born to dams treated with progesterone prenatally. A test II group included rats exposed to progesterone during prenatal as well as postnatal periods, and a control group had rats treated with a placebo (olive oil). The test groups revealed a significant reduction in sperm count, motility, and viability with higher abnormal forms than the control group (P< 0.05). Similarly, the test groups revealed significantly lower serum testosterone and higher FSH and LH levels (P< 0.001). Interestingly, the test II group showed pronounced sperm abnormalities, an alarming decrease in sperm viability and motility, and a significant accretion in the relative testicular weight compared to the test I group (p <0.001). Long-term (prenatal and early postnatal) treatment with synthetic progesterone hurts sperm quantity and quality, adversely affecting future male fertility.

Este estudio tuvo como objetivo aclarar el impacto de la exposición prenatal y posnatal a largo plazo a la progesterona exógena en la producción y función de los espermatozoides, el peso relativo de los órganos sexuales y los niveles de las hormonas relevantes en ratas. Sesenta ratas macho Wistar fueron incluidas y clasificadas en tres grupos (n=20 en cada uno). Un grupo de prueba I tenía ratas maduras nacidas de madres tratadas con progesterona prenatalmente. Un grupo de prueba II incluyó ratas expuestas a progesterona durante los períodos prenatal y posnatal, y un grupo de control tenía ratas tratadas con un placebo (aceite de oliva). Los grupos de prueba revelaron una reducción significativa en el recuento, la motilidad y la viabilidad de los espermatozoides con formas anormales más altas que el grupo de control (P < 0,05). De manera similar, los grupos de prueba revelaron niveles significativamente más bajos de testosterona sérica y niveles más altos de FSH y LH (P < 0.001). Curiosamente, el grupo de prueba II mostró anormalidades espermáticas pronunciadas, una disminución alarmante en la viabilidad y motilidad de los espermatozoides y una acumulación significativa en el peso testicular relativo en comparación con el grupo de prueba I (p <0.001). El tratamiento a largo plazo (prenatal y posnatal temprano) con progesterona sintética daña la cantidad y la calidad del esperma, lo que afecta negativamente la futura fertilidad masculina.

Changes in the Craniomaxillofacial Growth and Development of Sprague Dawley Rats Subjected to Permanent Experimental Unilateral Nasal Obstruction / Cambios en el Crecimiento y Desarrollo Cráneo Maxilo Facial de Ratas Sprague Dawley Sometidas a Obstrucción Nasal Unilateral Experimental Permanente

SUMMARY: Breathing is considered a vital function dependent on factors such as adequate permeability of the nasal route, which is linked to physiological functions, intellectual processes, and craniofacial growth. The aim of this study was to determine the changes in the craniomaxillofacial growth and bone development of Sprague Dawley rats subjected to permanent experimental unilateral nasal obstruction. Twenty-four newborn rats were used, randomized, and divided into experimental and control groups. The right nostril was obstructed, and weight, length, and Lee's index measurements were recorded at 8 and 16 weeks. Craniomandibular x-rays were taken of each animal, obtaining linear neuro- and viscerocranial measurements. Then, a biochemical analysis was performed to measure the alkaline phosphatase concentration. The results were analyzed in the SPSS software, performing a descriptive analysis, using a t-test for independent samples, comparing basal, cephalometric, and biochemical characteristics between the control and experimental groups, considering a significance range of 5%. When comparing the experimental and control groups, the variables length, weight, and Lee's index presented no significant differences. In the x-ray analysis, at 8 weeks, the Co-L1 and Co-Mn measurements were reduced, whereas the Ba-So increased, with significant differences. At 16 weeks, the L1-O, Po-Ba, and E-Mu measurements decreased; however, Co-Gn registered a greater value with significant differences. The alkaline phosphatase levels fell significantly at week 16 in the experimental group. In conclusion, the reduction of permanent nasal respiratory flow is related to modifications in facial growth at 8 and 16 weeks and to the reduction of alkaline phosphatases at 16 weeks.

La respiración se considera una función vital, dependiente de factores como la permeabilidad adecuada de la vía nasal, vinculada con funciones fisiológicas, procesos intelectuales y crecimiento cráneofacial. El objetivo de este estudio fue determinar los cambios en el crecimiento y desarrollo óseo cráneo maxilo facial de ratas Sprague Dawley sometidas a obstrucción nasal unilateral experimental permanente. Se utilizaron 24 ratas macho neonatas, randomizadas y divididas en grupo control y experimental. Fue realizada obstrucción nasal de la narina derecha y realizadas mediciones de peso, longitud e índice de Lee a las 8 y 16 semanas. Se efectuaron radiografías cráneomandibulares a cada animal, obteniendo medidas lineales de neuro y viscerocráneo. Posteriormente se realizó análisis bioquímico, para medir la concentración de fosfatasa alcalina. Los resultados fueron analizados en el software SPSS, realizándose análisis descriptivo, empleando prueba T para muestras independientes comparando características basales, cefalométricas y bioquímicas entre los grupos control y experimental, considerando un umbral de significancia de 5 %. Al comparar los grupos control y experimental, las variables longitud, peso e índice de Lee no presentaron diferencias significativas. En el análisis radiográfico, a las 8 semanas, las medidas Co-L1 y Co-Mn presentaron reducción, mientras que Ba-So aumentó, con diferencias significativas. A las 16 semanas, las medidas L1-O, Po-Ba y E-Mu disminuyeron, sin embargo, Co-Gn registró un mayor valor, con diferencias significativas. Los niveles de fosfatasa alcalina disminuyeron significativamente en la semana 16 en el grupo experimental. En conclusión, la reducción de flujo respiratorio nasal permanente se relaciona con modificaciones del crecimiento facial a las 8 y 16 semanas y con la reducción de ALK en análisis a las 16 semanas.

Efecto regenerador gástrico del consumo de Petroselinum sativum L. (perejil) en ratas con gastritis inducida por etanol

El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto regenerador gástrico del consumo de Petroselinum sativum L. (perejil) en ratas con gastritis inducida por etanol. Se realizó un estudio analítico, experimental clásico, transversal, prospectivo. Se trabajó con 36 ratas Wistar machos (250 ± 30 g.p.c.) distribuidas aleatoriamente en 6 grupos (n=6). Los grupos II-VI fueron sometidos a ayuno de 24 horas para inducirles úlcera gástrica administrándoles 10 mL/kg.p.c. de etanol al 70% vía orogástrica. Después de una hora, se procedió a sacrificar al grupo II para observar el daño ulceroso en el estómago. Después, se elaboró el extracto acuoso de hojas frescas de perejil (EAHP) y se administró a los demás grupos el siguiente tratamiento por vía orogástrica durante 3 días: grupo III, 10 mL/kg.p.c. de solución de NaCl al 0,9%; y EAHP a los grupos IV-VI (150, 300 y 600 mg/kg.p.c., respectivamente). Enseguida, las ratas fueron sometidas a ayuno de 24 horas para luego ser sacrificadas por desnucamiento. Posteriormente, se les realizó una laparotomía para la extracción del estómago. El EAHP generó mayor producción de moco gástrico en las dosis de 300 mg/kg.p.c. con 78,03% y de 600 mg/kg.p.c. con 80,52% (p<0,05). Esto concordó con lo observado histológicamente en la mucosa gástrica, mostrando solo signos de inflamación de la submucosa en los grupos que consumieron EAHP (IV-VI), en comparación con necrosis fibrinoide de los grupos que no lo consumieron (II y III). En conclusión, el consumo de EAHP tiene un efecto regenerador gástrico en ratas con gastritis inducida por etanol.

Our objective is to determine the gastric regenerative effect of Petroselinum sativum L. (parsley) consumption in rats with ethanolinduced gastritis. We developed an analytical, experimental, classical, cross-sectional, prospective study. We worked with 36 male Wistar rats (250 ± 30 g.p.c.) randomly distributed into 6 groups (n=6). Groups II-VI were subjected to a 24-hour fast to induce gastric ulcer by administering 10 mL/kg.p.c. of 70% ethanol via orogastric. After one hour, group II was sacrificed to observe the ulcerative damage in the stomach. Afterward, the aqueous extract of fresh parsley leaves (EAHP) was prepared, and the following treatment was administered to the other groups through the orogastric route for 3 days: group III, 10 mL/kg.p.c. 0.9% NaCl solution; and EAHP to groups IV-VI (150, 300, and 600 mg/Kg.p.c., respectively). The rats were then fasted for 24 hours before being sacrificed by breaking their necks. Subsequently, a laparotomy was performed to extract the stomach. The EAHP generated greater production of gastric mucus in the doses of 300 mg/kg.p.c. with 78.03% and 600 mg/kg.p.c. with 80.52% (p<0.05). This was consistent with what was observed histologically in the gastric mucosa, showing only signs of inflammation of the submucosa in the groups that consumed EAHP (IV-VI), compared with fibrinoid necrosis in the groups that did not consume it (II and III). In conclusion, the consumption of EAHP has a gastric regenerative effect in rats with ethanol-induced gastritis.

Non-Status Epilepticus female rats show seizure-like behaviors in the chronic phase of Pilocarpine experimental model / Ratas sem Status Epilepticus apresentam comportamento do tipo crise epiléptica na fase crônica do modelo experimental da Pilocarpina

Abstract Only few studies have focus on animals that received Pilocarpine (Pilo) and did not develop behavioral status epilepticus (SE) and, whether they may become epileptic in the model's chronic phase. Previews works observed mossy fiber sprouting in the hippocampus of Non-SE (NSE) rats, while others observed spontaneous and recurrent seizures (SRS) 6 - 8 months after animals received Pilo. It is known that neuronal excitability is influenced by female hormones, as well as, the occurrence of SE in castrated and non-castrated female rats. However, it is not known whether females that received Pilo and did not show SE, may have SRS. The aim of this work was to investigate whether castrated and non-castrated female rats that did not show behavioral SE after Pilo, will develop SRS in the following one-year. For that, animals received 360 mg/kg of Pilo and were video monitored for 12 months. SE females from castrated and non-castrated groups became epileptic since the first month after drug injection. Epileptic behaviors were identified watching video monitoring recordings in the fast speed. Castrated and Non-castrated NSE animals showed behaviors resembling seizures described by Racine Scale stages 1 - 3. Motor alterations showed by NSE groups could be observed only when recordings were analyzed in slow speed. In addition, behavioral manifestations as, rhythmic head movements, sudden head movements, whole body movements and immobility were also observed in both, SE and NSE groups. We concluded that NSE female rats may have become epileptic. Adding to it, slow speed analysis of motor alterations was essential for the observation of NSE findings, which suggests that possibly many motor alterations have been underestimated in epilepsy experimental research.

Resumo Poucos são os estudos com foco em animais que receberam Pilocarpina (Pilo) e não desenvolveram status epilepticus (SE) comportamental e, se os mesmos se tornarão epilépticos na fase crônica do modelo. Autores observaram o brotamento das fibras musgosas no hipocampo de ratos Não-SE (NSE), enquanto outros observaram crises espontâneas e recorrentes (CER) 6 - 8 meses após receberam a droga. A excitabilidade neuronal é influenciada pelos hormônios femininos e, da mesma forma, a ocorrência de SE em ratas castradas e não-castradas. Entretanto, não é sabido se as fêmeas que não apresentam SE terão CER. O objetivo deste trabalho foi investigar se fêmeas castradas e não castradas que não tiveram SE comportamental após a injeção de Pilo desenvolverão CER dentro de um ano. Para isto, os animais receberam 360 mg/kg de Pilo e foram videomonitorados por 12 meses. As fêmeas SE castradas e não-castradas se tornaram epilépticas desde o primeiro mês pós Pilo. O comportamento epiléptico foi identificado assistindo as gravações na velocidade rápida. As fêmeas NSE castradas e não-castradas apresentaram comportamentos similares aos estágios 1 - 3 da Escala de Racine. As alterações motoras nestes grupos (NSE) foram observadas apenas quando as videomonitoração foi analisada na velocidade lenta. Além destas, manifestações comportamentais como movimentos rítmicos da cabeça, movimentos súbitos da cabeça, movimentos de todo o corpo e imobilidade também foram observadas em ambos grupos, SE e NSE. Concluímos que as fêmeas NE podem ter se tornado epilépticas. Adicionado a isto, a análise das alterações motoras na velocidade lenta foi essencial para a observação dos achados das fêmeas NSE, o que sugere que possivelmente muitas alterações motoras têm sido subestimados na pesquisa em epilepsia experimental.

Embriopatía diabética y trastornos en el desarrollo reproductivo materno en ratas con diabetes pregestacional / Diabetic embryopathy and disorders in maternal reproductive development in rats with pregestational diabetes

Resumen OBJETIVOS: Determinar la repercusión de la diabetes pregestacional, con hiperglucemias moderadas, en el rendimiento reproductivo de la rata, crecimiento, desarrollo y morfología embrionaria en ratas Wistar. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio longitudinal, prospectivo y experimental efectuado en la Unidad de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Ciencias Médicas de Villa Clara, Cuba, en un modelo de diabetes moderada inducida neonatalmente a crías hembras de ratas Wistar de dos días de nacidas mediante la administración subcutánea de 100 mg/kg de peso corporal de estreptozotocina en una única dosis. A los 120 días de nacidas, las ratas de ambos grupos de experimentación (diabético y control) se aparearon con machos sanos. Se determinaron el peso y la glucemia durante la gestación y a los 11.5 días se practicó la cesárea. Se analizaron las variables del rendimiento reproductivo materno y de crecimiento, desarrollo y morfología externa en los embriones. Acorde con los desenlaces se utilizaron pruebas no paramétricas para el análisis de las variables cuantitativas y la prueba de χ2 para las variables cualitativas. RESULTADOS: La hiperglucemia moderada pregestacional provocó modificaciones en la ganancia de peso de la madre, la cantidad de reabsorciones, sitios de implantación, pérdidas preimplantación y eficiencia de implantación, así como en la morfología, talla y cantidad de somitas en los embriones. CONCLUSIONES: La diabetes moderada pregestacional alteró el rendimiento reproductivo materno y el crecimiento y desarrollo intrauterino de la descendencia en etapa embrionaria. La embriopatía diabética se manifestó, además, con malformaciones del sistema nervioso central.

Abstract OBJECTIVES: Diabetes mellitus is one of the most frequent disorders of pregnancy with adverse consequences for the mother and a high risk of diabetic embryopathy in the offspring. The objective of the research was to determine the effect of pregestational diabetes with moderate hyperglycemia on maternal reproductive performance, growth, development and embryonic morphology in Wistar rats. MATERIALS AND METHODS: Longitudinal, prospective and experimental study carried out at the Biomedical Research Unit of the University of Medical Sciences of Villa Clara, Cuba. A model of neonatally induced moderate diabetes was used in female Wistar rat pups two days old, by subcutaneous administration of 100 mg/kg of body weight of streptozotocin in a single dose. At 120 days after birth, rats from both experimental groups (diabetic and control) were mated with healthy males. Weight and glycemia were determined during pregnancy and at 11,5 days the cesarean section was performed. The variables of maternal reproductive performance and of growth, development and external morphology in the embryos were analyzed. According to the results, non-parametric tests were used for the analysis of the quantitative variables and the Chi-square test for the qualitative variables. RESULTS: Moderate pregestational diabetes caused changes in maternal weight gain, number of resorptions, implantation sites, preimplantation loss, and implantation efficiency, as well as in morphology, size, and number of somites in embryos. CONCLUSIONS: Moderate pregestational diabetes altered maternal reproductive performance and intrauterine growth and development of embryonic offspring. Diabetic embryopathy was also manifested by malformations of the central nervous system.

Indicadores morfométricos de la corteza cerebral frontal de gazapos de ratas Wistar con diabetes pregestacional

Introducción: La diabetes es una enfermedad que afecta el embarazo provoca complicaciones fetales; dentro de ellas son frecuentes las malformaciones congénitas. Por la imposibilidad práctica y ética de estudiar este proceso en gestantes es imprescindible realizar estudios experimentales empleando procedimientos morfométricos para determinar si la diabetes afecta el neurodesarrollo. Objetivo: Caracterizar morfométricamente la sustancia gris de gazapos de ratas Wistar normales y con diabetes mellitus pregestacional. Métodos: Se realizó un estudio experimental básico de serie de casos a 20 gazapos de ratas Wistar de los cuales 10 eran descendientes de diabetes pregestacional. Se caracterizaron indicadores morfométricos del tejido nervioso como espesor de corteza e indicadores nucleares como el perímetro. Resultados: La media de la altura de la sustancia gris cortical mostró un valor de 1,224 ± 303,7 μm para el grupo control y 1,014 ± 376,0 para los casos, al aplicar el test de diferencias de medias se encontró diferencia significativa (p ≤ 0,05) a favor del grupo control. Los valores de la media del perímetro nuclear en el grupo control fue de 42,80 ± 7,23 μm y en el grupo experimental el promedio fue de 39,68 ± 6,52 μm, al aplicar el test de diferencias de medias se encontró diferencia significativa (p ≤ 0,05) a favor del grupo control al presentar mayor perímetro nuclear. Conclusiones: El mayor espesor cortical y perímetro nuclear correspondió al grupo control evidenciándose el efecto deletéreo de la diabetes mellitus en el neurodesarrollo.

Introduction: Diabetes is a disease that affects pregnancy causing fetal complications; within them congenital malformations are frequent. Due to the practical and ethical impossibility of studying this process in pregnant women, it is essential to carry out experimental studies using morphometric procedures to determine if diabetes affects neurodevelopment. Objective: To characterize morphometrically the gray matter of kits from normal Wistar rats and those with pregestational diabetes mellitus. Methods: A basic experimental study of a series of cases was carried out on 20 young Wistar rats, of which 10 were descendants of pregestational diabetes. Morphometric indicators of the nervous tissue were characterized as thickness of the cortex and nuclear indicators such as perimeter. Results: The average height of the cortical gray matter showed a value of 1.224 ± 303.7 μm for the control group and 1.014 ± 376.0 μm for the cases. When applying the mean difference test, a significant difference was found (p ≤ 0.05) in favor of the control group. The values of the measurement of the nuclear perimeter in the control group was 42.80 ± 7.23 μm and in the experimental group the average was 39.68 ± 6.52 μm. When applying the mean different test, a significant difference was found (p ≤ 0.05) at favor of control group presenting greater nuclear perimeter. Conclusions: The greatest cortical thickness and nuclear perimeter corresponded to the control group, evidencing the deleterious effect os diabetes mellitus on neurodevelopment.

Rattus norvegicus infectados com Trypanosoma cruzi: efeitos clínicos do tratamento com Lycopodium clavatun e phosphorus ultradiluídos / Rattus norvegicus infected with Trypanosoma cruzi: clinical effects of treatment with highly diluted Lycopodium clavatun and phosphorus / Rattus norvegicus infectado con Trypanosoma cruzi: efectos clínicos del tratamiento con Clavatun licopodio altamente diluido y fósforo

A doença de Chagas causada pelo parasita Trypanosoma cruzi acomete milhões de pessoas no mundo e não conta com um medicamento de ação efetiva para o seu tratamento etiológico. As drogas disponíveis, o nifurtimox e o benznidazol possuem índices de cura baixos com efeitos colaterais e toxidade que dificultam a adesão dos pacientes à terapia. Este fato impulsiona a busca por alternativas de tratamento que sejam mais efetivas e menos agressivas. Sendo assim, este trabalho teve como objetivo a avaliação dos efeitos clínicos apresentados por Rattus norvergicus infectados por T. cruzi e tratados com soluções ultradiluídas de Lycopodium clavatum ou Phosphorus. O estudo envolveu 93 ratos com quarenta e cinco dias de idade infectados intraperitonealmente com 5x106 formas tripomastigotas sanguíneos da cepa Y de T. cruzi, distribuídos nos grupos: Sadio SD (n=13) - controle não infectado e não tratado, grupo CI (n=27) - controle infectado e tratado com solução hidroalccólica 7% (etanol ­ água), grupo LY diluição 1:1x1026 (n=27) - infectado e tratado com Lycopodium, grupo PH diluição 1:1x1026 (n=26) - infectado e tratado com Phosphorum. Os animais foram avaliados clinicamente através dos parâmetros peso, temperatura, consumo de água e ração, quantidade de excretas, diâmetro e comprimento intestinal, aspecto da pelagem e consistência das fezes. Este estudo mostrou que os parâmetros utilizados foram importantes para a definição clínica da infecção de Rattus novergicus, linhagem Wistar pelo T. cruzi. Mostrou que os medicamentos LY e PH apresentam efeitos benéficos na evolução da clínica dos animais tratados. A utilização de Lycopodium clavatum e Phosphorus diluídos na proporção de 1:1x1026, apresentaram efeitos diferentes. Oito e seis parâmetros de quatorze analisados mostraram efeitos positivos para LY e PH, respectivamente. Os parâmetros consumo de água e ração, quantidade de excretas, diarreia, alopecia difusa e comprimento intestinal apresentaram diferenças significativas em relação ao controle infectado mostrando que mais estudos são necessários com o uso de medicamentos ultradiluídos na infecção pelo T. cruzi.

Chagas disease caused by the parasite Trypanosoma cruzi affects millions of people worldwide and does not have an effective drug for its etiological treatment. The available drugs, nifurtimox and benznidazole, have low cure rates with side effects and toxicity that make it difficult for patients to adhere to therapy. This fact drives the search for treatment alternatives that are more effective and less aggressive. Therefore, this work aimed to evaluate the clinical effects presented by Rattus norvergicus infected by T. cruzi and treated with ultradiluted solutions of Lycopodium clavatum or Phosphorus. The study involved 93 forty five day old rats intraperitoneally infected with 5x106 blood trypomastigotes forms of the Y strain of T. cruzi, distributed in the following groups: Healthy SD (n=13) - non-infected and untreated control, CI group (n =27) - infected control and treated with 7% hydroalcoholic solution (ethanol ­ water), LY group dilution 1:1x1026 (n=27) - infected and treated with Lycopodium, PH group dilution 1:1x1026 (n=26) - infected and treated with Phosphorum. The animals were clinically evaluated through the parameters weight, temperature, water and feed consumption, amount of excreta, intestinal diameter and length, coat appearance and feces consistency. This study showed that the parameters used were important for the clinical definition of infection of Rattus novergicus, Wistar lineage by T. cruzi. It showed that LY and PH drugs have beneficial effects on the clinical evolution of treated animals. The use of Lycopodium clavatum and Phosphorus diluted in the ratio of 1:1x1026, showed different effects. Eight and six parameters out of fourteen analyzed showed positive effects for LY and PH, respectively. The parameters water and feed consumption, amount of excreta, diarrhea, diffuse alopecia and intestinal length showed significant differences in relation to the infected control, showing that more studies are needed with the use of ultradiluted drugs in T. cruzi infection.

La enfermedad de Chagas causada por el parásito Trypanosoma cruzi afecta a millones de personas en todo el mundo y no cuenta con un fármaco eficaz para su tratamiento etiológico. Los fármacos disponibles, nifurtimox y benznidazol, presentan bajas tasas de curación con efectos secundarios y toxicidad que dificultan la adherencia terapéutica de los pacientes. Este hecho impulsa la búsqueda de alternativas de tratamiento más eficaces y menos agresivas. Por lo tanto, este trabajo tuvo como objetivo evaluar los efectos clínicos presentados por Rattus norvergicus infectados por T. cruzi y tratados con soluciones ultradiluidas de Lycopodium clavatum o Fósforo. En el estudio participaron 93 ratas de cuarenta y cinco días de edad infectadas intraperitonealmente con 5x106 formas tripomastigotes sanguíneas de la cepa Y de T. cruzi, distribuidos en los siguientes grupos: SD sano (n=13) - control no infectado y no tratado, grupo CI (n =27) - control infectado y tratado con solución hidroalcohólica al 7% (etanol - agua), grupo LY dilución 1:1x1026 (n=27) - infectado y tratado con Lycopodium, grupo PH dilución 1:1x1026 (n=26) - infectado y tratado con Phosphorum. Los animales fueron evaluados clínicamente mediante los parámetros peso, temperatura, consumo de agua y pienso, cantidad de excrementos, diámetro y longitud intestinal, aspecto del pelaje y consistencia de las heces. Este estudio demostró que los parámetros utilizados eran importantes para la definición clínica de la infección de Rattus novergicus, linaje Wistar por T. cruzi. Demostró que los fármacos LY y PH tienen efectos beneficiosos en la evolución clínica de los animales tratados. El uso de Lycopodium clavatum y Phosphorus diluidos en la proporción de 1:1x1026, mostró efectos diferentes. Ocho y seis parámetros de los catorce analizados mostraron efectos positivos para LY y PH, respectivamente. Los parámetros consumo de agua y pienso, cantidad de excretas, diarrea, alopecia difusa y longitud intestinal mostraron diferencias significativas en relación al control infectado, mostrando que son necesarios más estudios con el uso de fármacos ultradiluidos en la infección por

Non-Status Epilepticus female rats show seizure-like behaviors in the chronic phase of Pilocarpine experimental model / Ratas sem Status Epilepticus apresentam comportamento do tipo crise epiléptica na fase crônica do modelo experimental da Pilocarpina

Only few studies have focus on animals that received Pilocarpine (Pilo) and did not develop behavioral status epilepticus (SE) and, whether they may become epileptic in the model's chronic phase. Previews works observed mossy fiber sprouting in the hippocampus of Non-SE (NSE) rats, while others observed spontaneous and recurrent seizures (SRS) 6 - 8 months after animals received Pilo. It is known that neuronal excitability is influenced by female hormones, as well as, the occurrence of SE in castrated and non-castrated female rats. However, it is not known whether females that received Pilo and did not show SE, may have SRS. The aim of this work was to investigate whether castrated and non-castrated female rats that did not show behavioral SE after Pilo, will develop SRS in the following one-year. For that, animals received 360 mg/kg of Pilo and were video monitored for 12 months. SE females from castrated and non-castrated groups became epileptic since the first month after drug injection. Epileptic behaviors were identified watching video monitoring recordings in the fast speed. Castrated and Non castrated NSE animals showed behaviors resembling seizures described by Racine Scale stages 1 - 3. Motor alterations showed by NSE groups could be observed only when recordings were analyzed in slow speed. In addition, behavioral manifestations as, rhythmic head movements, sudden head movements, whole body movements and immobility were also observed in both, SE and NSE groups. We concluded that NSE female rats may have become epileptic. Adding to it, slow speed analysis of motor alterations was essential for the observation of NSE findings, which suggests that possibly many motor alterations have been underestimated in epilepsy experimental research.

Poucos são os estudos com foco em animais que receberam Pilocarpina (Pilo) e não desenvolveram status epilepticus (SE) comportamental e, se os mesmos se tornarão epilépticos na fase crônica do modelo. Autores observaram o brotamento das fibras musgosas no hipocampo de ratos Não-SE (NSE), enquanto outros observaram crises espontâneas e recorrentes (CER) 6 - 8 meses após receberam a droga. A excitabilidade neuronal é influenciada pelos hormônios femininos e, da mesma forma, a ocorrência de SE em ratas castradas e não-castradas. Entretanto, não é sabido se as fêmeas que não apresentam SE terão CER. O objetivo deste trabalho foi investigar se fêmeas castradas e não castradas que não tiveram SE comportamental após a injeção de Pilo desenvolverão CER dentro de um ano. Para isto, os animais receberam 360 mg/kg de Pilo e foram videomonitorados por 12 meses. As fêmeas SE castradas e não-castradas se tornaram epilépticas desde o primeiro mês pós Pilo. O comportamento epiléptico foi identificado assistindo as gravações na velocidade rápida. As fêmeas NSE castradas e não-castradas apresentaram comportamentos similares aos estágios 1 - 3 da Escala de Racine. As alterações motoras nestes grupos (NSE) foram observadas apenas quando as videomonitoração foi analisada na velocidade lenta. Além destas, manifestações comportamentais como movimentos rítmicos da cabeça, movimentos súbitos da cabeça, movimentos de todo o corpo e imobilidade também foram observadas em ambos grupos, SE e NSE. Concluímos que as fêmeas NE podem ter se tornado epilépticas. Adicionado a isto, a análise das alterações motoras na velocidade lenta foi essencial para a observação dos achados das fêmeas NSE, o que sugere que possivelmente muitas alterações motoras têm sido subestimados na pesquisa em epilepsia experimental.

Non-Status Epilepticus female rats show seizure-like behaviors in the chronic phase of Pilocarpine experimental model

Abstract Only few studies have focus on animals that received Pilocarpine (Pilo) and did not develop behavioral status epilepticus (SE) and, whether they may become epileptic in the models chronic phase. Previews works observed mossy fiber sprouting in the hippocampus of Non-SE (NSE) rats, while others observed spontaneous and recurrent seizures (SRS) 6 - 8 months after animals received Pilo. It is known that neuronal excitability is influenced by female hormones, as well as, the occurrence of SE in castrated and non-castrated female rats. However, it is not known whether females that received Pilo and did not show SE, may have SRS. The aim of this work was to investigate whether castrated and non-castrated female rats that did not show behavioral SE after Pilo, will develop SRS in the following one-year. For that, animals received 360 mg/kg of Pilo and were video monitored for 12 months. SE females from castrated and non-castrated groups became epileptic since the first month after drug injection. Epileptic behaviors were identified watching video monitoring recordings in the fast speed. Castrated and Non-castrated NSE animals showed behaviors resembling seizures described by Racine Scale stages 1 - 3. Motor alterations showed by NSE groups could be observed only when recordings were analyzed in slow speed. In addition, behavioral manifestations as, rhythmic head movements, sudden head movements, whole body movements and immobility were also observed in both, SE and NSE groups. We concluded that NSE female rats may have become epileptic. Adding to it, slow speed analysis of motor alterations was essential for the observation of NSE findings, which suggests that possibly many motor alterations have been underestimated in epilepsy experimental research.

Resumo Poucos são os estudos com foco em animais que receberam Pilocarpina (Pilo) e não desenvolveram status epilepticus (SE) comportamental e, se os mesmos se tornarão epilépticos na fase crônica do modelo. Autores observaram o brotamento das fibras musgosas no hipocampo de ratos Não-SE (NSE), enquanto outros observaram crises espontâneas e recorrentes (CER) 6 - 8 meses após receberam a droga. A excitabilidade neuronal é influenciada pelos hormônios femininos e, da mesma forma, a ocorrência de SE em ratas castradas e não-castradas. Entretanto, não é sabido se as fêmeas que não apresentam SE terão CER. O objetivo deste trabalho foi investigar se fêmeas castradas e não castradas que não tiveram SE comportamental após a injeção de Pilo desenvolverão CER dentro de um ano. Para isto, os animais receberam 360 mg/kg de Pilo e foram videomonitorados por 12 meses. As fêmeas SE castradas e não-castradas se tornaram epilépticas desde o primeiro mês pós Pilo. O comportamento epiléptico foi identificado assistindo as gravações na velocidade rápida. As fêmeas NSE castradas e não-castradas apresentaram comportamentos similares aos estágios 1 - 3 da Escala de Racine. As alterações motoras nestes grupos (NSE) foram observadas apenas quando as videomonitoração foi analisada na velocidade lenta. Além destas, manifestações comportamentais como movimentos rítmicos da cabeça, movimentos súbitos da cabeça, movimentos de todo o corpo e imobilidade também foram observadas em ambos grupos, SE e NSE. Concluímos que as fêmeas NE podem ter se tornado epilépticas. Adicionado a isto, a análise das alterações motoras na velocidade lenta foi essencial para a observação dos achados das fêmeas NSE, o que sugere que possivelmente muitas alterações motoras têm sido subestimados na pesquisa em epilepsia experimental.

Daño en la pared arterial de las ratas Wistar sometidas a dieta hiperglucídica / Arterial wall damage in Wistar rats subjected to a hyperglycemic diet

RESUMEN Introducción: Los modelos experimentales en animales proporcionan una valiosa información para comprender los procesos fisiopatológicos de las lesiones de los vasos sanguíneos y sus consecuencias. Objetivo: Analizar los cambios histológicos y morfométricos que se observaron en la aorta abdominal de las ratas Wistar sometidas a una dieta hiperglucídica. Métodos: Se formaron aleatoriamente dos grupos experimentales de 10 animales cada uno. El grupo control alimentado con dieta estándar para la especie, y el grupo experimental alimentado con dieta estándar más sacarosa al 35 %, como agua de bebida desde el destete hasta las 20 semanas de vida. El estudio se realizó en muestras de aorta fijadas y procesadas por la técnica clásica de inclusión en parafina y coloreadas con las técnicas de hematoxilina - eosina y Verhoeff. Se realizó la descripción de las capas de la pared arterial y la determinación de variables morfométricas en cada lámina histológica. Resultados: Las ratas Wistar pertenecientes al grupo experimental desarrollaron modificaciones incipientes en la pared arterial de la aorta abdominal, las cuales corresponden con la presencia de tumefacción en la célula endotelial y vacuolización en la célula muscular lisa vascular, así como marcada desorganización de las fibras elásticas y musculares de la capa media. Las variables morfométricas que mostraron diferencias significativas entre los grupos fueron el grosor de la túnica media y el cociente media/ lumen. Conclusiones: La pared media resultó ser la capa más afectada demostrándose el efecto nocivo de la dieta hiperglucídica en la pared arterial.

ABSTRACT Introduction: experimental animal models provide valuable information to understand the physiological and pathological processes of blood vessel injuries and their consequences. Objective: to analyze the histological and morphometric changes observed in the abdominal aorta of Wistar rats subjected to a hyperglycemic diet. Methods: two experimental groups of 10 animals each were randomly formed. The control group was fed with a standard diet for this species, and the experimental group was fed with a standard diet plus 35% sucrose, as drinking water from weaning to 20 weeks of life. The study was performed on aortic samples fixed and processed by the classic paraffin embedding technique and stained with the hematoxylin-eosin and Verhoeff techniques. The description of the layers of the arterial wall and the determination of morphometric variables in each histological slide were made. Results: the Wistar rats belonging to the experimental group developed incipient changes in the arterial wall of the abdominal aorta, which correspond to the presence of endothelial cell swelling and vacuolation in the vascular smooth muscle cell, as well as marked disorganization of the muscle and elastic fibers of the middle layer. The morphometric variables that showed significant differences between the groups were the thickness of the tunica media and the media/lumen ratio. Conclusions: the middle wall turned out to be the most affected layer, demonstrating the harmful effect of the hyperglycemic diet on the arterial wall.

Implementación de barreras físicas para el control de roedores en residencias familiares periféricas a centros de abastecimiento de alimentos / Implementation of physical barriers to control rodents in peripheral family residences to food supply centers

Las especies Rattus norvegicus y R. rattus son originarias de Asia y hasta la fecha están presentes en todo el globo junto a los humanos. Estos roedores han introducido microorganismos patógenos como p.ej. Yersinia pestis, Bartonella y hantavirus en muchas áreas geográficas nuevas. Además, las ratas han adquirido nuevos macroparásitos fuera de sus áreas de distribución nativas y actúan como transmisores eficientes de patógenos entre la vida silvestre, animales domésticos, vectores y humanos. Por otro lado, los roedores dañan y contaminan mucha más comida de la que consumen. Cuando roen, dañan las instalaciones de embalaje y almacenamiento utilizadas para almacenar y transportar la comida. Los roedores contaminan los alimentos principalmente a través de sus excrementos, pelo y orina. Especies de ratas comensales como R. rattus y R. norvegicus producen alrededor de 40 excrementos al día cada uno. Si uno solo de estos excremementos se encuentra en su camino hacia los alimentos destinados a humanos existe la posibilidad de que los alimentos serán rechazados por inadecuados y su valor se reducirá significativamente. La finalidad de este trabajo, es disponer de barreras físicas con el fin de controlar la permanencia de roedores en residencias familiares periféricas alrededor de conglomerados de abastecimiento de alimentos en la ciudad de Huancayo, Perú. Los resultados mostrados en esta investigación, diagnosticaron una alta infestación de roedores en área circuncidantes del mercado de la ciudad de Huanuco de acuerdo a las zonas urbanizadas. El 100% de las residencias que se acogieron a los métodos de barrera física para el control de roedores, mostró un mayor impacto en algunas zonificadas que en otras. Este impacto se asoció significativamente con la implementación de barreras físicas(AU)

Rattus norvegicus and R. rattus are native to Asia and to date are present all over the globe alongside humans. These rodents have introduced pathogenic microorganisms such as Yersinia pestis, Bartonella and hantaviruses into many new geographical areas. In addition, rats have acquired new macroparasites outside their native ranges and act as efficient transmitters of pathogens between wildlife, domestic animals, vectors, and humans. On the other hand, rodents damage and contaminate much more food than they consume. When they gnaw, they damage packaging and storage facilities used to store and transport food. Rodents contaminate food mainly through their droppings, hair, and urine. Commensal rat species such as R. rattus and R. norvegicus each produce around 40 droppings per day. If even one of these droppings finds its way into food intended for humans, there is a chance that the food will be rejected as unsuitable and its value will be significantly reduced. The purpose of this work is to have physical barriers in order to control the permanence of rodents in peripheral family residences around food supply conglomerates in the city of Huancayo, Peru. The results shown in this investigation, diagnosed a high infestation of rodents in the area surrounding the market of the city of Huanuco according to the urbanized areas. 100% of the residences that used physical barrier methods to control rodents showed a greater impact in some zoned areas than in others. This impact was significantly associated with the implementation of physical barriers(AU)

Absorción mineral y retención ósea en ratas normales en crecimiento por el consumo de un yogur experimental reducido en lactosa que contiene galactooligosacáridos (GOS) / Mineral absorption and bone retention in normal growing rats by consumption of an experimental lactose-reduced yogurt containing galactooligosaccharides (GOS)

Introducción: Los GOS son prebióticos naturales presentes en la leche materna que pue-den obtenerse enzimáticamente a partir de la lactosa de leche de vaca durante la fabricación de yogur. El producto lácteo resultante será reducido en lactosa y contendrá prebióticos y bacterias potencialmente probióticas. Sin embargo, mantendrá la baja relación Ca/Pi que aporta la leche de vaca, lo que podría alterar el remodelamiento óseo y la mineralización. Objetivo: comparar si un yogur reducido en lactosa que contiene GOS (YE) ofrece ventajas adicionales respecto de un yogur regular sin GOS (YR) sobre las absorciones (Abs) de Ca y Pi, retención y calidad ósea durante el crecimiento normal. Al destete, ratas machos fueron divididas en 3 grupos alimentados con AIN ́93-G (C), YE o YR durante 28 días. Resultados: YE mostró el mayor aumento de lactobacilos fecales; producción de ácidos grasos de cadena corta especialmente p, profundidad de las criptas colónicas y menor pH cecal. El %AbsCa y %AbsPi aumentó en el siguiente órden: YE> YR> C (p < 0,05). El contenido de Ca y Pi en fémur, la densidad y contenido mineral óseos y los parámetros biomecánicos fueron similares en YE y C, mientras que YR mostró valores significativa-mente menores (p < 0,05). Conclusiones: YE aumentó las Abs y biodisponibilidad de minerales, alcanzando la retención y calidad ósea de C. El aumento en las Abs observado en YR no logró obtener la retención y calidad ósea de C. Conclusión: YE habría contrarrestado el efecto negativo del mayor aporte de Pi de la leche de vaca y sería una buena estrategia para lograr el pico de masa ósea y calidad del hueso adecuados, especialmente en individuos intolerantes a la lactosa. (AU)

Breast milk contains an optimal calcium/phosphate (Ca/Pi) ratio and GOS. These natural prebiotics can be enzymatically produced via cow's milk lactose inyogurt manufacture. This milk product is low in lactose and contains prebiotics and potentially probiotic bacteria but maintains a low Ca/Pi ratio that could alter bone remodeling and mineralization. We evaluated if a lactose-reduced yogurt containing GOS (YE) offers additional advantages over regular yogurt without GOS (YR) on Ca and Pi absorption (Abs), bone retention and quality during normal growth. Weaning male rats were divided into 3 groups fed AIN'93-G (C), YE or YR for 28 days. Results: YE showed the highest increase in fecal lactobacilli; short-chain fatty acids production, especially propionate and butyrate; intestine crypt depth, and the lowest cecal pH. AbsCa% and AbsPi% increased in this order: YE> YR> C (p <0.05). Ca and Pi content in femur, bone density and mineral content, and biomechanical parameters were similar in YE and C, while YR showed the significantly lowest value (p < 0.05). Conclusions: YE increased mineral Abs reaching the retention and bone quality of C. Although YR increased Abs, bone retention and quality did not achieve C values. Seemingly, YE compensated for the negative effect of the higher Pi supply and would be a good strategy to achieve adequate peak bone mass and bone quality, especially in lactose intolerant individuals. (AU)

Protective effect of NeuroEPO on the reproduction of diabetic rats / Efecto protector de la NeuroEPO en la reproducción de ratas diabéticas

Introduction: Pregestational diabetes constitutes a reproductive risk which requires new treatment strategies. NeuroEPO, a variant of the recombinant human erythropoietin produced in Cuba, has neuroprotective and hypoglycemic effects which can be considered for the treatment of this entity. Objective: To evaluate the protective effect of NeuroEPO on the reproduction of diabetic rats. Material and Methods: Four groups of adult female Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes were used. During pregnancy, one group received the vehicle and the rest of the groups received different doses of NeuroEPO (0,5 mg/kg, 0,75 mg/kg, and 1 mg/kg) subcutaneously, on alternate days, for a total of six applications. A group of non-diabetic rats was used as a control group. Glycemia and reproductive variables were evaluated. For comparisons, Analysis of Variance and Fisher's Exact Test were used. There were significant differences with p-values less than 0,05. Results: The group with vehicle presented maintained hyperglycemia, fewer implantations, and embryos, and increased gestational losses. In the group receiving 0,5 mg/kg of NeuroEPO, glycemia decreased significantly and the results of the reproductive variables were similar to the group of non-diabetic rats. With higher doses of NeuroEPO, gestational losses were increased. No congenital malformations were identified in either group. Conclusions: The repeated administration of 0,5 mg/kg of NeuroEPO has a beneficial effect on the reproduction of diabetic rats, which may be associated with the reduction of hyperglycemia. Other cytoprotective mechanisms of NeuroEPO should be evaluated in future studies(AU)

Introducción: la diabetes pre-gestacional constituye un riesgo reproductivo, lo que requiere nuevas estrategias de tratamiento. Teniendo en cuenta que la NeuroEPO, una variante de la eritropoyetina recombinante humana producida en Cuba, tiene efectos neuroprotectores e hipoglicemiantes. Objetivo: evaluar el efecto protector de la NeuroEPO en la reproducción de ratas diabéticas. Material y Métodos: se utilizaron cuatro grupos de ratas Wistar hembras adultas, con diabetes inducida por estreptozotocina. Durante la gestación, un grupo recibió el vehículo y el resto diferentes dosis de NeuroEPO (0,5 mg/kg, 0,75 mg/kg y 1 mg/kg), por vía subcutánea, en días alternos, para un total de seis aplicaciones. Se empleó un grupo de ratas no-diabéticas como control. Se evaluó la glicemia y variables reproductivas. Para las comparaciones se empleó el Análisis de Varianza y la Prueba Exacta de Fisher. Las diferencias se consideraron significativas con valores de p menores que 0,05. Resultados: el grupo con vehículo presentó hiperglicemia mantenida, menor número de implantaciones y embriones, e incremento de las pérdidas gestacionales. En el grupo que recibió 0,5 mg/kg de NeuroEPO, la glicemia disminuyó de forma significativa y los resultados de las variables reproductivas fueron similares al grupo de ratas no-diabéticas. Con las dosis superiores de NeuroEPO se incrementaron las pérdidas gestacionales. No se identificaron malformaciones congénitas en ninguno de los grupos. Conclusiones: la administración reiterada de 0,5 mg/kg de NeuroEPO tiene efecto beneficioso en la reproducción de ratas diabéticas, que puede estar asociado a la reducción de la hiperglicemia. Otros mecanismos citoprotectores de la NeuroEPO deben ser evaluados en futuros estudios(AU)

Relación del ácido fólico y los defectos del tubo neural en ratas Wistar / Relationship of folic acid and neural tube defects in Wistar rats

RESUMEN Introducción: los defectos del cierre del tubo neural son anomalías del sistema nervioso central superadas únicamente por los defectos cardíacos. En Pinar del Río existe un aumento de interrupciones de embarazo por diagnóstico de este defecto, se desconoce si los niveles de ácido fólico en las gestantes influyen en su incidencia. Objetivo: corroborar la relación entre los defectos del cierre del tubo neural en las crías de ratas Wistar y las dosis de ácido fólico administrada en las ratas Wistar gestadas. Métodos: se realizó un estudio experimental en ratas Wistar, se formaron cinco grupos de dos ratas hembras, dos que recibieron dosis de ácido fólico de 100 y 200 microgramos (µg) antes y durante la gestación, dos que recibieron 100 y 200 µg durante la gestación y un grupo control que no recibió ninguna dosis. La muestra estuvo constituida por 212 ratas recién nacidas, sacrificadas bajo normas internacionales. Se extrajo médula y cerebro para observar las anomalías, se tomaron fotomicrografía de los cortes realizados. El nivel de significación para todas las comparaciones estadísticas fue α ≤ 0,05. Resultados: se observaron en total trece espinas bífidas, once en el grupo control (26,19 %) y dos (4,65 %) en el de 200 µg durante la gestación, al comparar el grupo control respecto a los grupos tratados, la variable masa corporal presentaron significación estadística. Se observó que la presencia de espina bífida fue significativa en la hembra con respecto al macho. Conclusiones: se demostró la necesidad esencial de la ingestión de ácido fólico antes y durante la gestación en ratas Wistar y la asociación de espina bífida y sexo, el sexo femenino fue el predominante.

ABSTRACT Introduction: neural tube closure defects are anomalies of the central nervous system surpassed only by cardiac defects. In Pinar del Rio province there is an increase of pregnancy interruptions due to diagnosis of this defect, and it is not known if folic acid levels in pregnant women influence its incidence. Objective: to corroborate the relationship between neural tube closure defects in Wistar rats' pups and the doses of folic acid administered in pregnant Wistar rats. Methods: an experimental study was carried out in Wistar rats, forming five groups of two female rats; two of them received doses of folic acid of 100 and 200 micrograms (µg) before and during gestation, two that received 100 and 200 µg during gestation and a control group that did not receive any dose. The sample consisted of 212 newborn rats, sacrificed under international standards. Marrow and brain were extracted to observe the anomalies, and photomicrographs were taken of the sections made. The significance level for all statistical comparisons was α ≤ 0,05. Results: a total of thirteen spina bifida were observed, eleven in the control group (26,19 %) and two (4,65 %) in the 200 µg group during gestation, when comparing the control group with the treated groups, the body mass variable presented statistical significance. It was observed that the presence of bifid spina was significant in the female with respect to the male. Conclusions: the essential need of folic acid ingestion before and during gestation in Wistar rats and the association of spina bifida and sex were confirmed, being predominant in the female sex.

Alteraciones genitales en la infección por leptospiras en ratas Wistar gestadas / Genital alterations in leptospiras infection in pregnant Wistar rats

RESUMEN Introducción: la leptospirosis en Cuba se presenta de forma endémica, y a veces de forma epidémica, por lo que es un problema de salud. Su efecto sobre los genitales internos, en gestantes, ha sido poco tratado por los investigadores. Objetivo: describir las principales alteraciones en los genitales internos de ratas Wistar gestadas infestadas por leptospiras. Métodos: se realizó un estudio experimental en ratas Wistar preñadas: siete grupos con tres animales cada uno: un control negativo y seis casos con dosis de una concentración bacteriana de 300 millones de Leptospiras por mL; se inocularon dos mililitros a cada animal al cuarto día de gestadas por 17 meses. Se tomaron los genitales internos de todas las ratas el día 20 de la gestación, estos fueron procesados en parafina y teñidos con hematoxilina/eosina. Resultados: se observaron alteraciones en útero, ovarios y trompas; el mayor número de lesiones se presentaron en útero mientras que en ovarios y trompas se visualizaron la misma cantidad de lesiones. Conclusiones: la leptospirosis infectó los genitales internos con la producción de quistes, necrosis, abscesos, ooforitis y microhemorragias en ovarios; congestión vascular y hemorragias en las trompas uterinas y endometritis, hemorragias, miometritis, piometristis, perimetritis y congestión vascular en el útero. Predominaron las alteraciones congestivas y hemorrágicas.

ABSTRACT Introduction: leptospirosis in Cuba occurs endemically, and sometimes epidemically, making it a health problem. Its effect on internal genitalia in pregnant women has been little treated by researchers. Objective: to describe the main alterations in the internal genitalia of pregnant Wistar rats infested by leptospiras. Methods: an experimental study was carried out in pregnant Wistar rats: 7 groups with three animals each: 1 negative control and 6 cases with doses of a bacterial concentration of 300 million Leptospira per mL; each animal was inoculated with two milliliters on the fourth day of pregnancy for 17 months. The internal genitalia of all rats were taken on day 20 of gestation, processed in kerosene and stained with hematoxylin/eosin. Results: alterations were observed in the uterus, ovaries and tubes; the greatest number of lesions was present in the uterus while the same number of lesions was visualized in the ovaries and tubes. Conclusions: leptospirosis infected the internal genitalia producing cysts, necrosis, abscesses, oophoritis and microhemorrhages in the ovaries; vascular congestion and hemorrhages in the uterine tubes and endometritis, hemorrhages, myometritis, pyometristis, perimetritis and vascular congestion in the uterus. Congestive and hemorrhagic alterations predominated.